Wie wird Endotoxin getestet?

2019-07-10

Lyophilisierter Amöbozytenlysattest (LAL-Test) ist der am häufigsten verwendete Test für Endotoxin. Limulus-Amöbozyten-Lysat (LAL), d. H. Tachypleus-Amöbozyten-Lysat (TAL), ist eine Art lyophilisiertes Produkt, das hauptsächlich Amöbozyten enthält, die aus dem blauen Blut von Pfeilschwanzkrebsen extrahiert wurden.

LAL reagiert mit Endotoxinen, bei denen es sich um kleine von Bakterien abgeleitete hydrophobe Lipopolysaccharidmoleküle (LPS) handelt, die sich in der äußeren Zellmembran von gramnegativen Bakterien befinden, und bildet ein Gel-Gerinnsel, das quantifiziert werden kann. Endotoxin wird in Endotoxineinheiten pro Milliliter (EU / ml) gemessen.

Die turbidimetrische Technik und die chromogene Technik werden auch zum Nachweis von Endotoxinen eingesetzt.

Das Reaktionsprinzip der chromogenen Technik lautet: Das Amöbozytenlysat enthält eine Kaskade von Serinproteaseenzymen (Proenzymen), die durch bakterielle Endotoxine aktiviert werden können. Endotoxine aktivieren die Proenzyme, um aktivierte Enzyme (sogenannte Koagulase) zu produzieren. Letztere katalysieren die Spaltung des farblosen Substrats und setzen ein gelb gefärbtes Produkt pNA frei. Die freigesetzte pNA kann photometrisch bei 405 nm gemessen werden. Und die Absorption ist positiv mit der Endotoxinkonzentration korreliert, dann könnte die Endotoxinkonzentration entsprechend quantifiziert werden.

Und das Reaktionsprinzip der turbidimetrischen Technik ist ähnlich wie das der chromogenen Technik.


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